ЛОКАЛЬНОЕ СУБРЕТИНАЛЬНОЕ ВВЕДЕНИЕ КСЕНОГЕННЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, МЕЧЕННЫХ МАГНИТНЫМИ ЧАСТИЦАМИ, В ЭКСПЕРИМЕНТЕ


https://doi.org/10.25276/0235-4160-2014-4-65-71

Полный текст:


Аннотация

Цель. Разработать методику локального субретинального введения ксеногенных стволовых клеток, меченных магнитными частицами, и экспериментально обосновать ее эффективность.

Материал и методы. В работе использовалась линия стволовых клеток НЕК-293 GFP, меченная магнитными частицами. Исследование проведено на 84 глазах 42 кроликов породы шиншилла в возрасте 6 мес. весом от 2,5 до3,5 кг. Все правые глаза были опытными (42 глаза), левые (42 глаза) – контрольными. В опытной группе к склере подшивали комплекс полимерного эластичного магнитного имплантата (ПЭМИ) с лазерным зондом, производили срединную витрэктомию и с помощью специально разработанного дозатора вводили HEK-293 GFP под сетчатку. В группе контроля ПЭМИ с лазерным зондом не фиксировали. В сроки 1, 3, 5, 7, 14 суток и 1 мес. производили биомикроскопию, офтальмоскопию глазного дна с фотографированием, ультразвуковое офтальмосканирование, оптическую когерентную томографию (ОКТ), компьютерную томографию (КТ), морфологическое исследование (криогистологические срезы).

Результаты. По данным биомикроскопии в сроки наблюдения до 3 суток наблюдалась инъекция сосудов в зоне операции. По данным офтальмоскопии и ультразвукового исследования в 1-е сутки визуализировалась локальная отслойка сетчатки в зоне введения клеток, которая не наблюдалась в дальнейшие сроки наблюдения. По данным КТ подтверждено место расположения ПЭМИ. По данным морфологического исследования доказано, что в опытной группе клетки располагаются в субретинальном пространстве в сроки до 14 суток, а в группе контроля – только до 3 суток.

Выводы. Разработанный хирургический способ дает возможность контролировать введение клеток в субретинальное пространство, снижает риск повреждения тканей и выхода клеток в полость стекловидного тела. Предложенная методика позволяет осуществить фиксацию клеточного материала в месте их локального введения и дает возможность прогнозирования их движения. 


Об авторах

Ю. А. Белый
Калужский филиал МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова
Россия
Белый Юрий Александрович, доктор медицинских наук, профессор, зам. директора по научной работе


А. В. Терещенко
Калужский филиал МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова
Россия
Терещенко Александр Владимирович, доктор медицинских наук, директор Калужского филиала


С. А. Миргородская
МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова, Москва
Россия
Миргородская Светлана Александровна, аспирант �чн. консультант


А. А. Темнов
Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Москвы
Россия
Темнов Андрей Александрович, доктор медицинских наук, зав. лабораторией клеточных и физико-химических медицинских технологий


А. Д. Семенов
МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова, Москва
Россия
Семенов Александр Дмитриевич, доктор медицинских наук, профессор, гл. научный консультант


А. В. Ревищин
Институт биологии гена РАН, Москва
Россия
Ревищин Александр Владимирович, кандидат биологических наук, ст. научный сотрудник группы нейрогенетики и генетики развития отдела геномики и клеточных технологий


Г. В. Павлова
Институт биологии гена РАН, Москва
Россия
Павлова Галина Валерьевна, доктор биологических наук, профессор, руководитель группы нейрогенетики и генетики развития отдела геномики и клеточных технологий


Н. Н. Куст
Институт биологии гена РАН, Москва
Россия
Куст Надежда Николаевна, ст. лаборант-исследователь группы нейрогенетики и генетики развития отдела геномики и клеточных технологий


Список литературы

1. Белый Ю.А., Темнов А.А., Миргородская С.А. Разработка технологии культивирования мезенхимальных стволовых клеток с магнитными частицами для субретинального введения // Вестник ОГУ. – 2013. – Т. 4, № 153. – С. 40-43.

2. Белый Ю.А., Темнов А.А., Терещенко А.В., Миргородская С.А. Мезенхимальные стволовые клетки с магнитными частицами для субретинального введения в офтальмологии // Офтальмология. – 2013. – Т. 10, № 3. – С. 72-74.

3. Беляковский П.В., Позняк Н.И., Лобанок Е.С. Применение эмбриональных стволовых клеток и факторов роста стволовых клеток (stem cell factor, lif) при токсическом поражении зрительного нерва у кроликов // Рецепт. – 2009. – № 12. – С. 156-161.

4. Онищенко Н.А., Крашенинников М.Е. Клеточная трансплантация – перспективное направление регенерационной медицины // Биологические резервы клеток костного мозга и коррекция органных дисфункций / Под ред. В.И. Шумакова, Н.А. Онищенко. – М., 2009. – С. 49-76.

5. Ромащенко А. Д., Ковалев А.В. Способ лечения атрофии зрительного нерва посредством трансплантации аутологичных стволовых клеток // Официальный бюллетень Российского агентства по патентам и товарным знакам. – 2009. – № 26. – С. 8.

6. Тахчиди Х.П., Гаврилова Н.А., Комова О.Ю. и др. Влияние стволовых/ прогениторных клеток на функциональное состояние и степень выраженности дегенеративных изменений сетчатки у крыс линии Campbell // Офтальмохирургия. – 2010. – № 3. – С. 33-38.

7. Arbab A.S., Jordan E.K., Wilson L.B. et al. In vivo trafficking and targeted delivery of magnetically labeled stem cells // Hum. Gene Ther. – 2004. – Vol. 15, № 4. – P. 351-360.

8. Chacko D.M., Das A.V., Zhao X. et al. Transplantation of ocular stem cells: the role of injury in incorporation and differentiation of grafted cells in the retina // Vision Res. – 2003. – Vol. 43, № 8. – P. 937-946.

9. Ehnert S., Glanemann M., Schmitt A. et al. The possible use of stem cells in regenerative medicine: dream or reality? // Langenbecks Arch. Surg. – 2009. – № 394. – P. 985-997.

10. Hara A., Niwa M., Kunisada T. et al. Embryonic stem cells are capable of generating a neuronal network in the adult mouse retina // Brain Res. – 2004. – Vol. 999, № 2. – P. 216-221.

11. Hu Y., Tan H.B., Wang X.M. et al. Bone marrow mesenchymal stem cells protect against retinal ganglion cell loss in aged rats with glaucoma // Clin. Interv. Aging. – 2013. – № 8. – P. 1467-1470.

12. Jiang T.S., Cai L., Ji W.Y. et al. Reconstruction of the corneal epithelium with induced marrow mesenchymal stem cells in rats // Mol. Vis. – 2010. – № 16. – P. 1304-1316.

13. Jiang Y., Zhang Y., Zhang L. et al. Therapeutic effect of bone marrow mesenchymal stem cells on laser-induced retinal injury in mice // Int. J. Mol. Sci. – 2014. – Vol. 15, № 6. – P. 9372-9385.

14. Joe A.W., Gregory-Evans K. Mesenchymal stem cells and potential applications in treating ocular disease // Curr. Eye Res. – 2010. – Vol. 35, № 11. – P. 941-952.

15. Kyrtatos P., Lehtolainen P., JunemannRamirez M. et al. Magnetic tagging increases delivery of circulating progenitors in vascular injury // JACC Cardiovasc. Interv. – 2009. – Vol. 2, № 8. – P. 794-802.

16. Liu X.W., Zhao J.L. Transplantation of autologous bone marrow mesenchymal stem cells for the treatment of corneal endothelium damages in rabbits // Zhonghua Yan. Ke. Za. Zhi. – 2007. – Vol. 43, № 6. – P. 540-545.

17. Mears A., Kondo M., Swain P. et al. Nrl is required for rod photoreceptor development // Nature Genet. – 2001. – № 29. – P. 447-452.

18. Silvermann M.S., Hughes S.E. Photoreceptor transplantation in inherited and environmentally induced retinal degeneration: anatomy, immunohistochemistry and function // Prog. Clin. Biol. Res. – 1989. – № 314. – P. 687-704.

19. Song M., Kim Y., Roh J. et al. Using a neodymium magnet to target delivery of ferumoxide-labeled human neural stem cells in a rat model of focal cerebral ischemia // Hum. Gene Ther. – 2010. – Vol. 21, № 5. – P. 603-610.

20. Takahashi M., Palmer T.D., Takahashi J., Gage F.H. Widespread integration and survival of adult-derived neural progenitor cells in the developing optic retina // Mol. Cell Neurosci. – 1998. – Vol. 12, № 6. – P. 340-348.

21. Yanai A., Häfeli U.O., Metcalfe A.L. et al. Focused magnetic stem cell targeting to the retina using superparamagnetic iron oxide nanoparticles // Cell. Transplant. – 2012. – Vol. 21, № 6. – Р. 1137-1148.


Дополнительные файлы

Для цитирования: Белый Ю.А., Терещенко А.В., Миргородская С.А., Темнов А.А., Семенов А.Д., Ревищин А.В., Павлова Г.В., Куст Н.Н. ЛОКАЛЬНОЕ СУБРЕТИНАЛЬНОЕ ВВЕДЕНИЕ КСЕНОГЕННЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, МЕЧЕННЫХ МАГНИТНЫМИ ЧАСТИЦАМИ, В ЭКСПЕРИМЕНТЕ. Офтальмохирургия. 2014;(4):65-71. https://doi.org/10.25276/0235-4160-2014-4-65-71

For citation: Belyy Y.A., Тereshchenko A.V., Mirgorodskaya S.A., Temnov A.A., Semenov A.D., Revishchin A.V., Pavlova G.V., Kust N.N. LOCAL SUBRETINAL INJECTION TECHNIQUE OF XENOGENIC STEM CELLS LABELLED BY MAGNETIC PARTICLES IN EXPERIMENT. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2014;(4):65-71. (In Russ.) https://doi.org/10.25276/0235-4160-2014-4-65-71

Просмотров: 150

Обратные ссылки

  • Обратные ссылки не определены.


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0235-4160 (Print)
ISSN 2312-4970 (Online)